实验室繁菌放多久

实验室繁菌的放置时间取决于具体的繁菌种类、培养基和实验目的等因素。一般而言，繁菌的放置时间需要根据培养的需要进行判断，一般可以按照以下基本原则来考虑：

1. 不同的繁菌种类和培养基对放置时间有不同的要求，需要根据不同的繁菌种类和培养基的特点来进行判断。

2. 对于一些快速生长的繁菌，如大肠杆菌等，通常在培养基上的定植时间为 16~24 小时即可进行下一步实验。而对于一些生长缓慢的繁菌，如支原体等，则可能需要较长时间的培养。

3. 在实验的过程中，需要时刻注意繁菌的生长状况，避免过度繁殖或降解造成实验结果的误差。

总之，实验室繁菌的放置时间需要根据具体情况进行评估，以保证实验结果的准确性。经常观察和检查繁菌的生长状况，及时进行处理和调整，是保证实验成功的关键。

大肠杆菌常温放置会导致质粒降解，但短时间比如1-3天问题不大，而且一天只会导致大肠杆菌因为缺乏营养而停止生长，可以用来抽提质粒。超过三天会开始降解，一周后明显降解。质粒在4度可放置数个月，-20保存数年。

菌液一般放在-80度能保存1年。提出来的质粒最好以沉淀的形式保存，用的时候再溶解、抽提，沉淀、再使用。质粒是用TE溶解，效果会好些，-20度放置时间长了是会发生一定的分解，比如质粒不再像新提的时候 那样是3条带，可能会变成一条带居多。

可以转化一次后重新提一些新的继续保存，最好不要划线挑单克隆，而是转化复苏后直接加到含抗生素(antibiotic)的液体培养基中培养，因为单克隆中的质粒（特别是含有外源基因的重组质粒），可能存在基因突变的情况（虽然几率很小但是我在校正点突变的实验中就遇到过，基因原来测序正确的质粒经过一次重新转化划线挑单菌落提质粒后，再测序发现出现了一个新的碱基的突变）。

所以最好是同时保存一份含有质粒的菌。虽然再次复苏的时候长得会比较慢，但活化后，还是跟新的没有什么差别的。

保存大肠杆菌(Escherichia coli)菌种，-20度对于不含质粒的菌种一般是用15%的甘油保存，对于含有质粒的菌种一般用10%的甘油保存，（PET操作手册上有说明），甘油浓度高了质粒的稳定性不好。

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